SRM2925 重組血清白蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)品(NIST)(尿白蛋白初級參考標(biāo)準(zhǔn))旨在用于校準(zhǔn)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，用于測定人血清白蛋白 (HSA)。使用氨基酸分析確定該 SRM 中重組 HSA 的濃度。

一個單元的 SRM 2925 由兩個小瓶組成，每個小瓶含有大約 0.5 mL 的溶液。最終用戶需要評估 SRM 2925 是否適用于需要充分表征的蛋白質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)或評估的其他應(yīng)用，包括總蛋白質(zhì)的比色分析、凝膠擴(kuò)散、氨基酸分析、電泳或基于蛋白質(zhì)組學(xué)的實驗工作流程。

認(rèn)證濃度值：

重組人血清白蛋白 (HSA) 的認(rèn)證濃度值是通過使用同位素稀釋-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (ID-LC-MS/MS) [1] 的氨基酸分析確定的。 被測量是使用為每個氨基酸確定的物質(zhì)量和 HSA 的已知氨基酸序列計算出的重組 HSA 的總濃度。 計量溯源性是摩爾濃度的 SI 衍生單位（表示為每克納摩爾）。

經(jīng)認(rèn)證的重組 HSA 濃度：14.4 nmol/g ± 0.3 nmol/g

NIST 認(rèn)證值是 NIST 對其準(zhǔn)確性最有信心的值，因為所有已知或可疑的偏差來源都已被調(diào)查或考慮 [2]。重組 HSA 的認(rèn)證濃度是使用高階參考測量程序 [3] 確定的，該程序用氨基酸認(rèn)證參考材料校準(zhǔn)。不確定度提供值是覆蓋被測量的平均值的擴(kuò)展不確定度，與 ISO/JCGM 指南 [4] 一致。擴(kuò)展不確定度計算為 U = kuc，其中 uc 是組合標(biāo)準(zhǔn)不確定度，k 是對應(yīng)于該分析物約 95% 置信度的覆蓋因子 [4]。對于上面顯示的認(rèn)證值，k = 2。

非認(rèn)證值：

表 1 中列出了 SRM 2925 中重組 HSA 密度和濃度的非認(rèn)證參考值（以克/升表示）。真實值；然而，這些值不符合 NIST 的認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，并帶有相關(guān)的不確定性，這些不確定性可能僅反映測量精度，可能不包括所有不確定性來源，或者可能反映多種分析方法之間缺乏足夠的統(tǒng)計一致性 [2,4] . SRM 2925 中重組 HSA 的參考值濃度（以克/升表示）是使用相對分子質(zhì)量（根據(jù)氨基酸序列計算）、密度值和上述經(jīng)認(rèn)證的重組 HSA 濃度值計算得出的。計量溯源性是指濃度的 SI 測量單位，表示為克/毫升或克/升，由所使用的方法實現(xiàn)。相對分子質(zhì)量的非認(rèn)證信息值也包含在表 1 中。信息值是 SRM 用戶可能感興趣的值，但沒有足夠的信息來評估與該值相關(guān)的不確定性 [2]。信息值不能用于建立計量溯源性

對用戶的通知和警告

SRM2925 重組血清白蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)品(NIST)在畢赤酵母細(xì)胞中表達(dá)，可能含有對健康構(gòu)成威脅的毒素。在材料的處理和使用過程中，應(yīng)小心謹(jǐn)慎。

處理、儲存和使用說明

處理和儲存： SRM 2925 以冷凍（在干冰上）運(yùn)輸，收到后應(yīng)冷凍儲存直至準(zhǔn)備使用。 –20 °C 的冷凍室溫度可以存放長達(dá)一周。如果預(yù)計需要更長的儲存時間，材料應(yīng)儲存在 –80 °C 或以下。 SRM 不應(yīng)暴露在陽光或紫外線輻射下。在室溫（20°C 至 25°C）或冰箱（5°C 至 8°C）溫度下儲存解凍材料可能會導(dǎo)致組成蛋白質(zhì)的降解或修飾。

使用：待分析的 SRM 的冷凍小瓶應(yīng)從冰箱中取出，放置在冰上或室溫（20 °C 至 25 °C）下直至解凍。材料解凍后應(yīng)立即使用。在取出等分試樣之前，應(yīng)使用渦旋混合器將材料短暫混合。

材料來源：

SRM 2925 是重組 HSA 的冷凍水溶液，在畢赤酵母中表達(dá)。儲備材料購自 Albumin Bioscience，Albumin Therapeutics, LLC, (Huntsville, AL) 的業(yè)務(wù)部門，儲備緩沖液由 5% 磷酸鹽緩沖鹽水溶液組成，其中含有 4 mmol/L 辛酸鈉和 4 mmol/L 乙酰色氨酸。 SRM 2925 在 NIST 制備，方法是通過凝膠過濾色譜法（3,000 g/mol 截斷值）對儲備材料進(jìn)行脫鹽，并將儲備緩沖液更換為 50 mmol/L 碳酸氫銨水溶液。